食品添加劑琥珀酸單甘油酯

附　錄　A 

檢驗方法

A.1　 一般規定

除非另有說明，在分析中僅使用確認為分析純的試劑和GB/T 6682中規定的三級水。

試驗方法中所用標準滴定溶液、雜質測定用標準溶液、制劑及制品，在沒有注明其他要求時，均按GB/T 601、GB/T 602和GB/T 603之規定制備。試驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。

A.2　鑒別試驗

A.2.1 溶解性

溶于溫甲醇，乙醇和正丙醇。

A.2.2 脂肪酸試驗

A.2.2.1　試劑和材料

A.2.2.1.1　己烷。

A.2.2.1.2　氫氧化鉀乙醇溶液：28g/L。

A.2.2.1.3　鹽酸溶液：226→1000。

A.2.2.2  分析步驟

稱取1g樣品，與15mL氫氧化鉀乙醇溶液加熱回流1h。加15mL水，用約6mL鹽酸溶液酸化，有油滴或白至黃白色固體產生，它可溶于5mL己烷中。分出己烷層，再用5mL己烷萃取一次，合并己烷萃取液，蒸發至干。所得脂肪酸用氣相色譜法鑒別，試驗結果呈陽性。全部操作應在通風櫥中進行。

A.2.3 琥珀酸試驗

A.2.3.1　試劑和材料

A.2.3.1.1　鋅粉。

A.2.3.1.2　氯化銨溶液：5g/L。

A.2.3.1.3　濾紙：用含5%對二甲基氨基苯甲醛和20%三氯乙酸的苯溶液潤濕。

A.2.3.2　分析步驟

以A.2.2.2中水層液作為試樣溶液，取1滴試樣溶液，加入微量試管中，加1滴氯化銨溶液和鋅粉數mg。取一片濾紙覆蓋試管口。用微火焰持續加熱試管底部約1min。視琥珀酸含量的不同，濾紙上應顯現紅紫色或粉紅色斑點。

A.2.4 丙三醇試驗

A.2.4.1　試劑和材料

A.2.4.1.1　食品級氫氧化鈣。

A.2.4.1.2　硫酸氫鉀。

A.2.4.1.3　氫氧化鈉溶液：43g/L。

A.2.4.1.4　濾紙：用丙烯醛鑒別試劑（5%五氰基亞硝基高鐵酸二鈉水溶液和20%哌啶水溶液，臨用前按1:1配制）潤濕。

A.2.4.2  分析步驟

以A.2.2.2中水層液作為試樣溶液，取5mL該試樣溶液，移入試管中，加過量的食品級氫氧化鈣，置于沸水中5min，期間振搖若干次，冷卻后過濾。取該濾液1滴，放于試管內，加約50mg硫酸氫鉀。取一片濾紙覆蓋試管口。用微火焰持續加熱試管底部。濾紙應呈現藍色，表明存在丙三醇。加氫氧化鈉溶液后，則轉變成淡紅色。

A.3　酸值的測定

A.3.1 試劑和材料

A.3.1.1　乙醇：中性，用氫氧化鈉溶液中和。

A.3.1.2　氫氧化鈉標準滴定溶液：c（NaOH）=0.1mol/L。

A.3.1.3　酚酞指示液：10g/L。

A.3.2 分析步驟

稱取0.1g樣品，精確至0.0002g，溶于50mL乙醇中，加1mL酚酞指示液，用氫氧化鈉標準滴定溶液滴定至微紅色，保持10s不褪色為終點。

A.3.3 結果計算

酸值（以KOH計）w1, 數值以毫克每克（mg/g）表示，按公式(A.1)計算：

              …………………………(A.1)

   式中：

V——氫氧化鈉標準滴定溶液的體積的數值，單位為毫升(mL)；

c —— 氫氧化鈉標準滴定溶液濃度的準確數值，單位為摩爾每升(mol/L)；

m ——樣品質量的數值，單位為克(g)；

M ——氫氧化鉀的摩爾質量的數值，單位為克每摩爾(g/mol) [M=56.109]。

A.4　羥值的測定

A.4.1 試劑和材料

A.4.1.1　吡啶：以酚酞為指示劑，用鹽酸溶液（1+110）中和。

A.4.1.2　中性正丁醇：以酚酞為指示劑，用氫氧化鉀乙醇標準滴定溶液滴定，至出現粉紅色且保持15s不變色。

A.4.1.3　乙?；瘎阂宜狒c吡啶按1+3混勻，貯存于棕色瓶中。

A.4.1.4　氫氧化鉀-乙醇標準滴定溶液：c(KOH)=0.5mol/L。

A.4.1.5　酚酞指示液：10g/L。

A.4.2 分析步驟

稱取約2g樣品，精確至0.000 1g，置于250mL磨口錐形瓶中，加入5mL±0.02mL乙?；瘎?，連接冷凝管，在水浴上加熱回流1h。從冷凝管上端加入10mL水于錐形瓶中，繼續加熱10min后，冷卻至室溫。用15mL中性正丁醇沖洗冷凝管，拆下冷凝管，再用10mL中性正丁醇沖洗瓶壁。加入8滴酚酞指示液，用氫氧化鉀-乙醇標準滴定溶液滴定至溶液呈粉紅色即為終點。同時進行空白試驗。

為校正游離酸，稱取約10g樣品，精確至0.01g。置于錐形瓶中，加入30mL吡啶，加入5滴酚酞指示液，用氫氧化鉀-乙醇標準滴定溶液滴定至溶液呈粉紅色。

A.4.3 結果計算

羥值以w2 計,數值以毫克每克（mg/g）表示，按式(A.2)計算:

         …………………………(A.2)

  式中：

V1  ——樣品消耗氫氧化鉀乙醇標準滴定溶液體積的數值,單位為毫升(mL)；

V0 ——空白試驗消耗氫氧化鉀乙醇標準滴定溶液體積的數值,單位為毫升(mL)；

V2——校正游離酸消耗氫氧化鉀乙醇標準滴定溶液體積的數值,單位為毫升(mL)；

c ——氫氧化鉀乙醇標準滴定溶液濃度的準確數值，單位為摩爾每升(mol/L)；

m3 ——樣品質量的數值，單位為克(g)；

m0——校正游離酸測定時樣品質量的數值，單位為克（g）；

M —— 氫氧化鉀的摩爾質量的數值，單位為克每摩爾(g/mol) [M=56.109]。

A.5　碘值的測定

A.5.1 試劑和材料

A.5.1.1　一氯化碘。

A.5.1.2　韋氏溶液：所有物料和玻璃器皿均需干燥，取19.00g一氯化碘，溶于700mL乙酸和300mL四氯化碳配成的混合液1000mL中。如溶液不澄清，過濾。貯存于陰涼暗處。

A.5.1.3　四氯化碳。

A.5.1.4　碘化鉀溶液：100g/L。

A.5.1.5　硫代硫酸鈉標準滴定溶液：0.1mol/L。

A.5.1.6　淀粉指示液：10g/L。

A.5.2 分析步驟

稱取0.5g樣品，精確至0.000 1g，置于碘量瓶中，加入10mL四氯化碳，再用移液管吸入韋氏溶液25mL。搖勻。塞緊塞子，與陰涼（20～25℃）暗處放置30min。加碘化鉀溶液15mL和水100mL。 然后在強烈搖動下用硫代硫酸鈉標準滴定溶液滴定至黃色接近消失，加淀粉指示液1～2mL，并繼續滴定至藍色消失為止。同時進行空白試驗。

A.5.3 結果計算

碘值以w3 計, 以碘計，數值以克每百克（g/100g）表示，按式(A.3)計算:

          …………………………(A.3)

  式中：

V3——空白試驗消耗硫代硫酸鈉標準滴定溶液體積的數值,單位為毫升(mL)；

V4——試驗溶液消耗硫代硫酸鈉標準滴定溶液體積的數值,單位為毫升(mL)；

c ——硫代硫酸鈉標準滴定溶液濃度的準確數值，單位為摩爾每升(mol/L)；

m ——試料質量的數值，單位為克(g)。

A.6　游離琥珀酸、結合琥珀酸的測定

A.6.1 試劑和材料

A.6.1.1　苯。

A.6.1.2　氫氧化鈉甲醇標準滴定溶液：c(KOH)=0.02mol/L。溶解4g氫氧化鈉于1000mL無水甲醇中，移取200mL該溶液至1000mL容量瓶中，用無水甲醇稀釋并定容，搖勻。以酚酞為指示劑，琥珀酸以干基計標定該溶液。

A.6.1.3　酚酞指示液：10g/L。

A.6.2 分析步驟

稱取約125mg樣品，精確至0.000 1g，置于盛有100mL苯的250mL分液漏斗中，用溫水加熱分液漏斗使樣品溶解，作為試樣溶液。置100mL苯于另一個分液漏斗中，作為空白溶液。然后均按如下方式處理：冷卻漏斗中的物質，加50mL水，翻轉漏斗約20次，使之混勻。靜置15min后移取水層至125mL的錐形瓶中，向分液漏斗中加10mL水，翻轉漏斗5次，將洗液倒入125mL錐形瓶中。于錐形瓶中加入5滴酚酞指示液，用氫氧化鈉甲醇標準滴定溶液滴定。對空白溶液做同樣處理，并記錄凈耗用體積，單位為mL，以V1表示。

將苯層移入500mL圓底燒瓶中，用10mL苯洗滌漏斗。在燒瓶中加入幾顆沸石，在約60℃和部分真空下蒸發苯，最好使用薄膜蒸發器，用10mL甲醇溶解燒瓶中的殘渣，加10mL水和5滴酚酞指示液，用氫氧化鈉甲醇標準滴定溶液滴定。對空白溶液做同樣處理，并記錄凈耗用體積，單位為mL，以V2表示。

A.6.3 結果計算

游離琥珀酸的質量分數以w4 計, 數值以%表示，按公式(A.4)計算:

          …………………………(A.4)

式中：

V1 ——試驗凈消耗氫氧化鈉甲醇溶液體積的數值,單位為毫升(mL)；

c ——氫氧化鈉甲醇標準滴定溶液濃度的準確數值，單位為摩爾每升(mol/L)；

m ——樣品質量的數值，單位為毫克(mg)。

結合琥珀酸的質量分數以w5 計, 數值以%表示，按式(A.5)計算:

          …………………………(A.5)

式中：

V2  ——試驗凈消耗氫氧化鈉甲醇溶液體積的數值,單位為毫升(mL)；

c ——氫氧化鈉甲醇標準滴定溶液濃度的準確數值，單位為摩爾每升(mol/L)；

m ——樣品質量的數值，單位為毫克(mg)。